文献转载---农残快速检测技术及常见问题解决方法

文献转载---农残快速检测技术及常见问题解决方法

马冰聪

（阜蒙县农产品质量安全检验检测站）

一、农残快速检测原理

有机磷和氧基甲酸醋类农药是我国目前使用量最大的农药，而且较多的是禁止使用在果品、蔬菜上的。该类农药在生物体内可以与乙酰胆碱酯酶(Ache)结合，并不易分离，即乙酰胆碱酯酶的活性被抑制，致使人体神经传导中的乙酰胆碱不能水解而积累，神经过度兴奋，出现中毒症状甚至死亡。基于此原理，以乙酰胆碱酯酶苘蔬菜的苯取液反应若受到抑制即表示该萃取液中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的残留/由手酶的活性被破坏，使之不能正常分解乙酰胆碱，根据乙酰胆碱酯酶活性变化程度来测定果品蔬菜样品中的残留农药。

二、农残快速检测操作流程（以SJ-10农药残留检测仪为例）

1. 前期准备

启动SJ-10农药残留检测仪让其自检并预热10 -15分钟，以确保光源稳定；打开电脑，登录复讯农药残留检测系统，进行端口设置并连接检测仪；对前

一天对照液的参照值及检测信息进行清零。

2. 对照液的制备及测试对照液的制备:

取酶lOOul,缓冲液2.5毫升，加人比色皿中，混匀，再加入显色剂lOOul，底物20ul。摇匀后立即将比色皿放人仪器中1/1进行对照测试，测试结果应在0.3-0.8之间，若超出此范围，疑似操作有误或显色时间过长，.需輦做，直至合格眘保存结某。

3. 待测样品信息的录入

按待测样品的编号顺序录入该样品的生产单位,样品名称、检测标准等信息。

4. 检测样品液的制备

(1) 取2 克果蔬样品（叶菜剪成1 厘米见方的小片，瓜果取1 厘米见方的横截面) 放人瓶中，加人10毫升缓冲液，振荡提取2 分钟后过滤，取出清夜即为待测试液；(2) 取酶lOOul待测液2 .5毫升，加人比色皿中，混匀（静置抑制10分钟）后，加人显色剂lOOul，底物20uL 盖上比色皿颠倒两次后立即把比色皿放人仪器中进行样品测试。

5. 农残检测结果判定

(l ) 样品的抑制率小于50% ，说明试样中的农药残毒性小，该样品合格。

(2) 若样品的抑制率大于或等宁5 0 % , 说明试样中的农药残毒性大，该样品不合格，通知暂停交易，并进行追踪改进和报告主管部门。

(3 ) 着样品的抑制率在40%-50%之同为疑似农残超标样品，需复查。如果复查后抑制率还是在40%以上，则需气相色谱等仪器分析法作进一步的确认或通知暂停交易，并进行追踪改进和报告_ 管部门。

三、常见的检测结果异常现象

1. 假阳性原因分析及解决方法

(1) 检查空白对照值是否正确。抑制率是样品检测值与空白对照值的比率，故空白对照值是检测结果正确与否的关键。.当出现系统性的假阳性、(即全部或多数样品是阳性）时,应首先检查对照值是否正常和准确。

(2) 检查取样方法是否正确。取样方法不舍会造成假阳性，如生姜、葱、蒜、韭菜、香菜等蔬菜因其本身含有对酶活性有影响的次生物质，以上样品应使用整株浸泡法或冲洗法取样P如果在锓泡或冲洗时祥品中汁液流出，检测就会出现假阳性。所以针对此类样品，应考虑出现阳性时是否为操作不当所致。

(3) 检查反应温度是否一致。温度对酶的活性和稳定性影响很大，所以实验应在恒温条件下进行。冬季，实验室如不能满足恒温条件，应将1 0 分钟的酶反应过程放在水浴锅中进行;夏季t室温较高时酶液活性会随着时间延长而明显下降，上午配制好的试剂，用在上牛时做一般要比用在中午时做的对照检测值大，若下午进行检测时没有重新做对照裣测，结果常常会出现假阳性。所以当温度有变化时，检测前务必先做空白对照。

(4) 检查酶抑制反应时间。抑制时间长短影响酶的抑制率，随着抑制时间的延长，抑制率也随之提高。如果样品加人底物后没有迅速放入比色池，延长了酶反应时间，结果就会同时出现多个抑制率为阳性(实为假阳性）。所以实验中必须使空白和样品的反应时间完全一致。

2. 出现0 . 01%或负值的原因检测中出现多个0 . 01%或负值一般是因实际检测吸光值大于对照检测吸光值而造成的系统错误。抑制率是样品值与对照值比较而得到的，所以当做对照检测时加人的试剂量不准确，导致测出的对照值小于实际值，就会m 现抑制率中有多个0.01% 的异常现象。这种情况下首先要重做对照，并注意移液枪的使用方式，避免溶液洗空或推液不尽导致所取溶液体积不准而造成检测数据偏差。

3.个别通道无数值的原因

(1) 当比色池中某个通道紫外灯不亮，检测时该通道将不会出现抑制率。所以如有通道无数值,先检查速测仪器的紫外光灯光源是不是出现了故障。

(2) 如果确认仪器通道没有出现故障，检测人员应再回想是否某个样品未加入某类试剂(酶、底物、显色剂)。

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北京佰司特贸易有限责任公司（快检业务）（https://www.best-science.org/），办公地址为北京市朝阳区劲松三区华腾大厦，我们是一家新型高新技术公司，集研发、生产、销售于一身，公司专注于快速检测和在线监测的技术开发和综合解决方案，目前产品涵盖毒化检测，爆炸物检测，环境监测，食品安全，烟草农残检测等多个领域。公司团队现有国家青年千人博士生导师1人，博士以上学历专家团队3人，专利30余项，员工本科率达到100%。

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烟草农残定性（胶体金）/定量（荧光）快速检测的项目包括：二甲戊灵、多菌灵、三唑酮、三唑醇等10多种；烟草疫病定性（胶体金）/定量（荧光）快速检测的项目包括：青枯病，花叶病等多种。烟草农残和疫病的定性/定量检测方法适合多种检材，如：新鲜烟叶、干烟叶、烟叶碎末等；检测速度快，一般为10分钟/样品，对大部分的检测灵敏度优于20ppb（ng/g）。