花叶病毒检测卡(荧光定量)

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烟草花叶病毒检测卡(荧光定量)

一、概要

花叶病毒是由蚜虫传播的一种在植物上寄生的病毒。花叶病毒病和坏疽(环斑)花叶病通常在同一植株上作为合并症发生 ,危害十分严重。 花叶病毒病,最初表现为叶片部分或整体萎蔫,呈黄白色斑驳的花叶状,出现皱缩。生长初期感染和发病的植株,生长不良,不结球,损失惨重. 坏疽(环斑)花叶病,在叶脉间形成许多1~3mm的黑褐色水清状斑点或轮斑,叶脉和叶柄上出现紫褐色水渍状坏死条斑。这种症状也出现在叶球内部。有的植株单侧出现病斑,导致叶球扭曲;有的在生长后期感染发病,只在叶球内部的叶片形成病斑。

烟草花叶病毒 tobacco mosaic virus 缩写TMV,为RNA病毒,是烟草花叶病等的病原体,属于Tobamovirus群,是目前烟草生产上分布最广、 发生最为普遍的一类病害 ,对烟草的危害极大。烟草花叶病和番茄花叶病早为一般所了解。叶上出现花叶症状,生长陷于不良状态,叶常呈畸形。

本试剂盒采用单克隆抗体和荧光定量技术结合,用于快速检测粮食、蔬果、烟草中的花叶病毒,适用于各种单位现场快速检测的需求。用于试纸条的检测灵敏度可达10000 cfu/g。以求达到早发现,精准施治,为青枯病监测及防控提供重要技术支撑。与仪器分析技术相比具有快速、简便、低成本等特点, 操作时间仅需15分钟。

二、适用范围

可定性、定量检测烟叶样本花叶病毒数量。

三、试剂盒构成

    试纸条、1.5ml离心管(内含0.5ml缓冲液)、捣棒、吸管、干燥剂

四、使用单位需自备的设备

      手持式青枯病菌数量荧光检测仪

      或

      紫外线手电筒(波长365nm

五、操作步骤

1)从原包装袋中取出所需数目的试纸条,打开后请在一个小时内尽快使用。

2取烟草脚叶叶柄基部约1-1.5cm左右的样本至含有缓冲液的1.5ml离心管中,使用捣棒上下捣10-15次捣碎

3)用移液器取碎的样本溶液70ul(滴管2-3滴)垂直滴于加样孔中。

4)液体流动时开始计时,反应10min,判读结果。

六、定性判断

   将紫外线手电筒(波长365nm)打开,照射试纸条T处和C处,观察荧光条带。

阴性(-):C线处显红色荧光,T线处不显,表示组织样本中青枯病菌数量低于检测限。

阳性(+):C线和T线处同时显红色荧光,表示组织样本中青枯病菌数量等于或者高于检测限。

无效:    C线处未显红色荧光,表明不正确的操作过程或试纸条已失效。在此情况下,应再次仔细阅读说明书,并用新的试纸条重新测试。




   样品中花叶病毒数量检测定性结果显示

七、定量检测

1)将手持式花叶病毒数量荧光检测仪开机。

2)将试纸条插入样品孔,然后按测定。

3)获得样品中花叶病毒数量,输出结果。