青枯病检测卡（荧光定量）

青枯病检测卡（荧光定量）

一、概要

烟草青枯病是由茄科劳尔氏菌（也称青枯病菌）引起的维管束病害，南方烟区危害严重，发病初期单靠肉眼很难觉察，一旦发现有萎焉等症状，病菌已经破坏烟杆髓部，用药控制已无效果。加强带菌未发病的烟株检测，提前防治是关键。许多研究表明烟株的发病率随脚叶叶柄基部含菌量的增加而升高。

本试剂盒采用单克隆抗体和荧光定量技术结合，是新一代青枯病菌数量检测产品，通过对烟株脚叶叶柄基部及叶片青枯病数量进行检测，以求达到早发现，精准施治，为青枯病监测及防控提供重要技术支撑。与仪器分析技术相比具有快速、简便、低成本等特点, 操作时间仅需15分钟。

二、适用范围

可定性、定量检测烟叶样本青枯病菌数量。

三、试剂盒构成

    试纸条、1.5ml离心管（内含0.5ml缓冲液）、捣棒、吸管、干燥剂

四、使用单位需自备的设备

      手持式青枯病菌数量荧光检测仪

    紫外线手电筒（波长365nm）

五、操作步骤

（1）从原包装袋中取出所需数目的试纸条，打开后请在一个小时内尽快使用。

（2）取烟草脚叶叶柄基部约1-1.5cm左右的样本至含有缓冲液的1.5ml离心管中，使用捣棒上下捣10-15次捣碎。

（3）用移液器取捣碎的样本溶液70ul（滴管2-3滴）垂直滴于加样孔中。

（4）液体流动时开始计时，反应10min，判读结果。

六、定性判断

   将紫外线手电筒（波长365nm）打开，照射试纸条T处和C处，观察荧光条带。

阴性（-）：C线处显红色荧光，T线处不显，表示组织样本中青枯病菌数量低于检测限。

阳性（+）：C线和T线处同时显红色荧光，表示组织样本中青枯病菌数量等于或者高于检测限。

无效：    C线处未显红色荧光，表明不正确的操作过程或试纸条已失效。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试纸条重新测试。

   样品中青枯病菌数量检测定性结果显示

七、定量检测

（1）将手持式青枯病菌数量荧光检测仪开机。

（2）将试纸条插入样品孔，然后按测定。

（3）获得样品中青枯病菌数量，输出结果。